CRISPR-based Non-nucleic Acid Detection
广州专场:CRISPR非核酸靶标检测(适配体、aTF、功能性DNA/RNA、split-Cas化学诱导二聚化)四大策略。
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CRISPR-basedNon-nucleic Acid
Detection
王金博士
吐露港生物/ToloBio
wangjin@tolobio.com
2026/04/25
华南师范大学
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CRISPR技术用于核酸检测的原理
待检靶标:DNA/RNA
向导RNA
CRISPR-Cas蛋白:Cas12/Cas13
反式切割活性/旁路切割活性:靶标存在,切割探针,释放信号!
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待检靶标:DNA/RNA
向导RNA
CRISPR-Cas蛋白:Cas12/Cas13
反式切割活性/旁路切割活性:靶标存在,切割探针,释放信号!
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CRISPR技术用于核酸检测的原理
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CRISPR非核酸靶标检测技术:反式切割活性=信号放大器
Zhanget al.,TrendsBiotech,2025
便捷、高敏、不怕气溶胶污染
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(Lianget al.,NatCommun,2019)
allosteric TF
CRISPR技术用于非核酸检测的原理:activator
靶标:代谢小分子
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(Xiong,etal.,J. Am. Chem. Soc. 2020)
(Li,etal.,Anal. Biochem. 2021)
Aptamer
Antibody
(Chen,etal.,Anal. Chem. 2020)
CRISPR技术用于非核酸检测的原理:activator
靶标:各类大小分子,金属离子
靶标:各种抗原
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(Haoet al.,NatNanotechnol.,2023)
CRISPR技术用于非核酸检测的原理:activator
靶标:Protease
Proteasesubstrate
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7(Kanget al.,Biosens. Bioelectron.,2023)
CRISPR技术用于非核酸检测的原理:gRNA
(Mahaset al.,Anal. Chem. 2022)
MAIGRET
靶标:ligand、Antibody
(Miceliet al.,NAR,2025)
crRNAtranscription
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CRISPR技术用于非核酸检测的原理:gRNA
靶标:各种小分子/TargetRNA
(Huet al.,NAR,2025)
靶标:各种非核酸靶标
(Zhanget al.,NAR,2025)
(Wuet al.,Small,2023)crRNAgeneration
靶标:ligand
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Cas12a Cas12a
Ac
AcrV A5
Ac-CoA CoA
CobB
NAD+NAM
Ac (inactive)(active)
(invadingDNA)
Kanget al.,CellDis,2022
Cas12a的可逆修饰调控:anti-anti-CRISPR
Zhuangetal.,FrontiersBioenBiotech,2024
PTM/HOLMES(NAD)
发现 应用
CRISPR技术用于非核酸检测的原理:ac-Cas
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(unpublished)
CRISPR技术用于非核酸检测的原理:split-Cas
人血药浓度监测:Sirolimus
I.
II.
植物激素检测:ABA细菌第二信使:c-di-GMP
III.
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CRISPR-Dx技术走向产业化的过程中
需要标准化
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12Cas酶/reporter探针
CRISPR诊断产业化离不开Cas酶活力的标准化
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